Como quase toda pequena cidade que se preze, Pirenópolis tem a religiosidade do povo como uma de suas marcas. Tanto que a Festa do Divino Espírito Santo (realizada na época de Pentecostes, 50 dias após a Páscoa, ou seja, está bem próxima) é considerada a maior manifestação popular do município (trazida por portugueses).

Em Pirenópolis, a Festa do Divino dura em torno de 20 dias e se estende pela cidade (na Igreja, nas ruas, teatro e beira-rio) e pela zona rural. Receber o Divino Espírito Santo significa acolher suas bênçãos, como em Pentecoste os apóstolos de Cristo receberam. Mistura entre as várias manifestações caminhadas, teatro, apresentação de grupos folclóricos, novenas e as tradicionais Cavalhadas (encenações da luta entre mouros e cristãos), em que populares vão às ruas mascarados (a pé ou a cavalo).

A Igreja Matriz de Nossa Senhora do Rosário (a maior construída no centro oeste brasileiro) por sua simplicidade e beleza é uma atração à parte. Erguida ainda em 1732 (nos primeiros anos do povoamento), era utilizada na celebração de missas, batizados, casamentos, funerais e cemitério apenas da população branca. Em 1747, foi construída no município a Igreja Nossa Senhora do Rosário dos Pretos, dedicada aos negros.

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